實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)是以腫瘤細(xì)胞為樣本,選用一體式超聲波細(xì)胞破碎儀對(duì)細(xì)胞樣品進(jìn)行超聲破碎,以便后續(xù)對(duì)細(xì)胞樣品的蛋白提取。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、儀器準(zhǔn)備:一體式超聲波細(xì)胞破碎儀XM-650T
2、樣品準(zhǔn)備:培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)皿中刮下來(lái)放在1.5ml管中,加入100μl裂解液,置于冰上孵育30min。
3、儀器操作:打開(kāi)儀器,使用2mm探頭,設(shè)置參數(shù):功率為10%,工作3s、間歇5s,間歇模式,總時(shí)間30s。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束:置于4℃離心機(jī)13000rpm離心20min,觀察樣品管內(nèi)樣品破碎效果,
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
5、觀察到樣品已完全破碎,離心后的樣品呈澄清上清無(wú)雜質(zhì),沉淀物為細(xì)胞碎片。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1.為保障蛋白樣品活性,操作全程在冰上進(jìn)行
2.因樣品量較少,超聲功率盡量調(diào)小,時(shí)間設(shè)為間隔模式
3.每個(gè)樣品不同,超聲完成一個(gè)樣品后,用純水清洗后進(jìn)行下一個(gè)
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